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BIOHUB無血清細(xì)胞凍存液說明書

更新時間:2023-10-24      點擊次數(shù):618

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產(chǎn)品描述
細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,減少細(xì)胞代謝,以便長期儲存的一種技術(shù),是細(xì)胞長期保存的重要手段。細(xì)胞凍存液通過冷凍保護(hù)劑在凍存過程中對細(xì)胞進(jìn)行保護(hù),以減少或防止冷凍冰晶對細(xì)胞造成的損傷。
BIOHUB 無血清細(xì)胞凍存液(藥用級)是一款采用醫(yī)用原料無血清、無需程序降溫的細(xì)胞凍存液,廣泛適用于多種哺乳動物細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞)的凍存。該凍存液特別優(yōu)化的配方含有雙重保護(hù)細(xì)胞的成份,從細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外同時保護(hù)細(xì)胞免受凍存時冰晶的損傷,大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇率和活力,可用于細(xì)胞長期保存。該產(chǎn)品配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。
與傳統(tǒng)凍存液相比,本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清,降低血清中未知成分和病毒等感染物質(zhì)給凍存帶來的影響與風(fēng)險,同時,可省去繁瑣費時的程序降溫過程,細(xì)胞可重懸于本產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長期保存,或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個凍存過程。
產(chǎn)品性質(zhì)
該產(chǎn)品已通過嚴(yán)格的內(nèi)毒素、滲透壓、pH 測試和無菌檢測(細(xì)菌、真菌和支原體檢測)。成分明確,極大降低批次間差異
產(chǎn)品特點
1、即用型細(xì)胞凍存液——優(yōu)化的wan全營養(yǎng)成分配方,不需要逐次用多種試劑自行配制凍存液
2、直接凍存于-80℃冰箱,長期保存(>5 年),不需要程序性降溫
3、高安全性,病毒、病菌和支原體等污染可能性低——不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌病毒和支原體等污染
使用方法
使用方法
一 凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟
  1. 選擇處于指數(shù)生長期的細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于離心管中。

  2. 1000 rpm-2000 rpm,離心 5 分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。

  3. 加入適量 4℃預(yù)冷的 BIOHUB 無血清細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。 (按照細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存液的量,推薦凍存密度:1x106 至 5x106cells/mL。)

  4. 將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,建議每管 1mL 或 1.5mL。

直接將細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。如果想放入液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少 12 小時,方可移至液氮罐中長期保存。
二  凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟
  1. 在 15 mL 離心管中加入 5-10 mL 平衡至室溫的wan全培養(yǎng)基。

  2. 從-80℃冰箱/液氮中取出凍存的細(xì)胞,立即放入 37℃水浴鍋或其他細(xì)胞復(fù)蘇設(shè)備中,迅速解凍。

  3. 將凍存管中的細(xì)胞懸液逐滴轉(zhuǎn)移至預(yù)先準(zhǔn)備好的含wan全培養(yǎng)基的離心管中,1000 rpm-1500 rpm,離心 5 分鐘,收集細(xì)胞沉淀,棄上清(操作時小心,切勿將細(xì)胞沉淀移去)。

  4. 加入適量平衡至室溫的wan全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種到事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中,輕輕搖晃培養(yǎng)容器,使細(xì)胞分布均勻。

  5. 鏡檢細(xì)胞后,可根據(jù)各自研究的需要和方法進(jìn)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。培養(yǎng) 5-24h 后,觀察細(xì)胞狀態(tài),可視情況更換鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。

實驗案例分析
1.選擇處于對數(shù)生長期的四種細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集細(xì)胞于離心管中。
2.1000 rpm,離心 5 分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。
3.加入適量 4℃預(yù)冷的 BIOHUB 無血清細(xì)胞凍存液、T 公司凍存液、X 公司凍存液分別重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。凍存密度為 1x106 cells/mL。
4.將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,每管 1mL,放入-80℃冰箱中,冷凍保存。
5.凍存 6 個月后,進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,統(tǒng)計細(xì)胞存活率。

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細(xì)胞凍存 6 個月后復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,統(tǒng)計細(xì)胞存活率

運輸及保存方法
保存:短期:2-8℃ 6 個月;長期-20℃保存,24 個月。
運輸:冰袋運輸。


注意事項
  1. 本產(chǎn)品可-30℃至-10℃保存,若長期不用,再次使用時,請在 2-8℃或室溫(22-25℃,不超過 4小時)融化 ;

  2. 避免反復(fù)凍融;

  3. 使用此無血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞后,應(yīng)盡量減少凍存細(xì)胞在外存放時間,盡快移入-80℃超低溫冰箱長期保存;

  4. BIOHUB 無血清細(xì)胞凍存液(藥用級)含有 DMSO,部分對 DMSO 敏感的細(xì)胞、淋巴細(xì)胞或干細(xì)胞凍存,建議使用本產(chǎn)品對其進(jìn)行試驗性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng),確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存;

  5. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時間不宜過長,以免影響凍存效率;

免責(zé)聲明: 本公司將不為任何不正當(dāng)使用此產(chǎn)品所發(fā)生的意外負(fù)責(zé);為了您的健康安全,請規(guī)范操作,穿戴實驗服與手套開展實驗;
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及治療


貨號品名規(guī)格品牌
78EC10001-100ml無血清細(xì)胞凍存液100mlBIOHUB
78EC10001-500ml無血清細(xì)胞凍存液500mlBIOHUB






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