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肽N-糖苷酶 F說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2023-10-24      點(diǎn)擊次數(shù):440

1.png

產(chǎn)品描述
PNGase F 是一種酰胺酶,切割糖蛋白上的 N-連接糖,切割的糖型有:高甘露糖、雜合和復(fù)雜寡糖,切割位點(diǎn)為:最內(nèi)側(cè)的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之間。PNGase F 還提供不含甘油的形式,便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。
本公司 PNGase 是重組表達(dá),并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。
產(chǎn)品特點(diǎn)
? 糖蛋白的 N-連接糖的去糖基化
? PNGase F 幾乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-連接糖。
產(chǎn)品活性
活性定義
1 活性單位指在 37℃下, 1×PNGase 反應(yīng)緩沖體系下,60 min 內(nèi)將 10 µg 變性 RNase B 中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。糖基化RNase B分子量約 17,000 Da,去糖基后約13,683 Da。
活性測(cè)定條件
1× PNGase Buffer:糖蛋白變性緩沖液(含 0.1% SDS,10 mM DTT)、1×GlycoBuffer 2 緩沖液、1% NP-40,37℃反應(yīng) 1 小時(shí)。
糖蛋白于 1×糖蛋白變性緩沖液(含 0.5% SDS,40mM DTT)中 100℃ 煮沸 10 分鐘使其變性。
產(chǎn)品組成
組成78BFA10004-15kU78BFA10004-75kU
PNGase15 kU75 kU
10×PNGase Buffer0.5 ml1.5 ml
10% NP40(10×)0.5 ml1.5 ml
10× 糖蛋白變性 Buffer0.5 ml1.5 ml
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,5 mM EDTA,50% Glycerol,pH 7.5 @ 25°C
反應(yīng)緩沖液
10×PNGase Buffer:500 mM Sodium Phosphate (pH 7.5 @ 25°C)
其它緩沖液
10×糖蛋白變性緩沖液(Glycoprotein Denaturing Buffer):5% SDS,400 mM DTT
10×NP-40:10% NP-40。
運(yùn)輸與保存
干冰運(yùn)輸,-20℃可保存 2 年,避免反復(fù)凍融
質(zhì)量控制
經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
注意事項(xiàng)
1、已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制,所以在反應(yīng)混合物中必須加入終濃度 1%的 NP-40。
2、要使天然糖蛋白去糖基化,建議增加酶量并延長(zhǎng)溫育時(shí)間。


貨號(hào)品名規(guī)格品牌
78BFA10004-15kU肽N-糖苷酶 F15kUBIOHUB
78BFA10004-75kU肽N-糖苷酶 F75kUBIOHUB







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